RESUMEN
Objetivo: Evaluar antes y después de la aplicación de un programa de intervención de higiene bucal la presencia de placa bacteriana supragingival y de Porphyromona gingivalis. Pacientes y Método: A 30 escolares se les realizó mensualmente un muestreo de placa bacteria del surco gingival, índice de O´Leary y reforzamiento de la técnica de higiene bucal; durante tres meses. Resultados: La bacteria Porphyromona gingivalis estuvo presente en el 100% de los casos durante todo el período de intervención. A los 30 días de la intervención de higiene bucal la disminución del índice de O´Leary fue de un 21,15% y las unidades formadoras de colonias bacterianas en un 21,51%. Luego a los 60 días el índice de O´Leary disminuyó en un 29,45% y las unidades formadoras de colonias en un 16,12%. Conclusión: Se concluye que la implementación de un programa de intervención de higiene bucal influye directamente en la composición de la placa bacteriana del surco gingival disminuyendo el número de unidades formadoras de colonias de Porphyromona gingivalis en la medida que la higiene bucal mejora. La mayor disminución fue a los 30 días.
INTRODUCCION

Actualmente la odontología se ha orientado a la prevención de las patologías que afectan la cavidad bucal, dentro de estas, se encuentra la enfermedad periodontal. Se considera que es necesario instaurar medidas que tiendan al con- trol de las bacterias periodontopatógenas pre- sentes en la placa bacteriana, con el fin de disminuir la prevalencia de la enfermedad perio- dontal.
La enfermedad periodontal es un problema de salud oral en Chile cuya prevalencia es alrededor de un 96%. En 2005 Van Dyke y colaboradores1, comentan que la acumulación constante en el tiempo de placa bacteriana supragingival provee condiciones propicias para el establecimiento de la flora periodontopa- tógena, cuya presencia es necesaria pero no suficiente para desencadenar la enfermedad periodontal. En 2002 Kimura y colaboradores2, aseguran que la colonización de los microor- ganismos periodontales puede ocurrir tempra- namente en la niñez sin evidencias clínicas de enfermedad periodontal. En 2003 Darby y Curtis3, sugieren que la colonización por P. Gingivalis, A. Actinomycetemcomitans y T. Forsythensis puede ocurrir a una edad muy temprana. De modo que el aumento de la placa supragingival colabora en el desarrollo de placa subgingival favoreciendo a futuro con las pato- logías periodontopatógenas. La hipótesis que planteda es que la aplicación de un programa de intervención de higiene bucal contribuye a disminuir la cantidad de placa bacteriana y a modificar la presencia de Porphyromona gingivalis en escolares de 6º y 7º Año Básico de la Comuna de Chiguayante. De modo que se evalúa antes y después del programa de inter- vención de higiene bucal la presencia de placa bacteriana supragingival y de Porphyromona gingivalis; siendo éste el objetivo del trabajo.
Para este estudio se utilizó un enfoque metodo- lógico cuantitativo, usando para ello un estudio de cohorte.
PACIENTES Y METODOS
El universo de estudio lo constituyeron alum- nos de 6° y 7° básico, asistentes a dos Escuelas municipalizadas, ubicadas en la comuna de Chiguayante: Hipólito Salas y Bélgica. La se- lección consistió en trabajar con escolares de alimentación sana, hábitos responsables, sin pa- tologías sistémicas, sin tratamientos de fluor (colutorio) y que no presenten tratamientos den- tales durante el desarrollo de la investigación. La muestra se formó por 30 alumnos escogidos por conveniencia del universo, de estos, 2 fue- ron excluidos por no tener la autorización del apoderado y 3 por asistir a un solo tiempo de muestreo, por lo que la muestra final se consti- tuyó por 25 niños. Los procedimientos seguidos estuvieron de acuerdo con las normas éticas de la Declaración de Helsinki del 2000.
Al inicio de la investigación se evaluó el estado inicial de los escolares que se puede considerar como el control (tiempo 0), inmedia- tamente después se procedió a intervenir los hábitos de higiene oral a través de instrucciones de cepillado. La técnica de cepillado consistió en cepillar primero la arcada superior y luego la inferior, abarcando las superficies vestibular, palatino/lingual y oclusal. Además se indicó la hora y frecuencia de cepillado al día (después de cada comida y tres veces al día).
Luego se muestreó a los 30 días (tiempo 1) y a los 60 días (tiempo 2). Mensualmente, en terreno, se muestreó la placa bacteriana del surco gingival a través de conos de papel este- rilizados directamente del surco gingival del primer molar permanente superior de cada pa- ciente. Cada cono fue colocado en un tubo Eppendorf con 1 ml de caldo Tioglicolato
(Merck) y fueron refrigerados a 4 ºC. La placa bacteriana supragingival se muestreó a través del índice de O'Leary por medio de tabletas reveladoras (Oral B; Erythrosine E127).
En el laboratorio las muestras de placa bacteriana de surco gingival se cultivaron sem- brando 100 μn una estufa de cultivo a 37 °C.
Para la identificación de la bacteria en estu- dio se realizó a través de las características macroscópicas de la colonia, las cuales son: tamaño, forma, bordes y color. Una vez identi- ficadas las características de la colonia se pro- cedió a realizar dos pruebas de identificación bacteriana. La primera fue la tinción Gram, para esto se tomó una colonia que cumpliera con las características macroscópicas requeri- das: tamaño pequeño a mediano, forma con- vexa, bordes completos y color gamuza a tosta- do o negro. La tinción se realizó con safranina y cristal violeta, posteriormente se observó al mi- croscopio con aumento de inmersión (1000x) para ver la afinidad tintorial y morfología bacte- riana. La segunda prueba de identificación utili- zada fue la prueba de la catalasa, para lo cual se usó agua oxigenada de 10 vol (Diperox) si eran positivas se observó efervescencia o bur- bujeo. Finalmente, se procedió al recuento de unidades formadoras de colonias (UFC).
La información generada en cada muestreo se compara con el tiempo cero y se genera una
diferencia denominada “delta”. De modo que el delta 1 corresponde a la diferencia entre el inicio de la intervención y a los 30 días (T0-T1), y delta 2 la diferencia el inicio y a los 60 días (T0-T2). El análisis estadístico utilizado fue el test de Wilcoxon ya que existe una dependen- cia en el tiempo con la intervención de higiene oral; el nivel de significancia fue un p < 0,05.
RESULTADOS
El índice de O'Leary (Figura 1) indica el porcentaje de placa bacteriana en la superficie dental. El programa de intervención de higiene oral tuvo un impacto manifestado en un des- censo. El mayor descenso de la placa bacteriana fue al tiempo 1 (30 días) con un delta 1 de un
21,15%, en cambio a los 60 días (T2) con un delta 2 fue un 29,45%; en ambos casos anterio- res respecto a tiempo inicial (T0) considerado como un 100%. En ambos deltas existe dife- rencia significativa con un p < 0,05 (Test de Wilcoxon). A lo largo de toda la intervención la placa bacteriana en la superficie dental dismi- nuye, pero a los 30 días se registró la mayor disminución.
Las unidades formadoras de colonias bacte- rianas (UFC) muestreadas en el surco gingival (Figura 2) indican que hubo un descenso a los 30 días (T1) con un delta 1 de un 21,45% y a los
60 días (T2) con un delta 2 de un 16,12%; en relación al 100% de T0. Solamente el delta 1 presenta diferencia significativa con un p < 0,05 (Test de Wilcoxon). Sólo a los 30 días Porphy- romona gingivalis disminuye y luego a los 60 días tiende a aumentar.

DISCUSIÓN
Investigaciones realizadas por McClellan y colaboradores4 y Lamell y colaboradores5 esta- blecen que Porphyromona gingivalis está pre- sente en un 37% de los niños, que su coloniza- ción puede ocurrir muy tempranamente en la niñez y que es un habitante común en la cavi- dad bucal de los niños a cualquier edad. La diferencia en éste estudio radica que Porphy- romona gingivalis se presentó en el 100% de los escolares.
El índice de O'Leary mostró una disminu- ción constante a lo largo del tiempo en cambio para las UFC no fue así. El mayor impacto en la composición de la flora del surco gingival fue a los 30 días correlacionándose con el mayor descenso de las bacterias de la superficie dental.
Goodson y colaboradores6, demostraron que la aplicación de un programa de intervención mejora la higiene bucal y disminuye el número de UFC. Esto es concordante con los resulta- dos presentados por este estudio, los que mues- tran que la implementación de un programa de intervención de higiene bucal genera una ten- dencia a la disminución de las UFC de Porfhy- romona gingivalis. Por otro lado, el efecto mostrado en relación a la composición de la placa bacteriana del surco gingival parece ser una simple reducción en el número de UFC y no una modificación de su presencia.
Los hallazgos de este estudio demuestran que pese a no existir una relación estadística- mente significativa entre el índice de O'Leary y el número de UFC presentes en la placa bacte- riana del surco gingival, el número de UFC varía en relación directa a la variación del índi- ce de O'Leary en cada caso individual. Este hecho se puede deber a que el número de UFC presentes en cada persona depende a su vez de otros factores tales como inmunidad y cambios hormonales.
Dalawai, establece que la gingivitis es el resultado de una pobre higiene bucal, seguido de la acumulación de placa bacteriana e irrita- ción gingival. Si bien la presencia de bacterias periodontopatógenas es esencial para que se desarrolle la enfermedad periodontal, estas por sí solas no son suficientes para producirla, lo que concuerda con el estudio realizado por Serrano y colaboradores8. A su vez Concalves y colaboradores9, afirman que la enfermedad periodontal es causada por bacterias de la flora bucal sólo cuando el número de estos microor- ganismos aumentan, y la irritación subsiguiente supera las defensas del huésped.
Gafan y colaboradores10, afirman que la detección de patógenos periodontales antes de la pubertad puede ser provechosa para la iden- tificación de niños que necesitan programas de salud oral más eficaces para reducir el riesgo de desarrollar la enfermedad periodontal des- pués de la pubertad. En Chile, el MINSAL a través de la norma en prevención de enferme- dades gingivales y periodontales11 establece que lo que hoy se conoce sobre la etiología, preven- ción y tratamiento de las enfermedades perio- dontales, permite desarrollar e implementar es- trategias de promoción y de prevención de es- tas enfermedades, ya sea a nivel individual como en el nivel comunitario. De lo anterior se desprende la importancia de desarrollar progra- mas de intervención de higiene bucal orienta- dos a educar a la población con el fin de preve- nir el desarrollo de patologías asociadas a la cavidad bucal, dentro de las cuales está la enfermedad periodontal.

Actualmente la odontología se ha orientado a la prevención de las patologías que afectan la cavidad bucal, dentro de estas, se encuentra la enfermedad periodontal. Se considera que es necesario instaurar medidas que tiendan al con- trol de las bacterias periodontopatógenas pre- sentes en la placa bacteriana, con el fin de disminuir la prevalencia de la enfermedad perio- dontal.
La enfermedad periodontal es un problema de salud oral en Chile cuya prevalencia es alrededor de un 96%. En 2005 Van Dyke y colaboradores1, comentan que la acumulación constante en el tiempo de placa bacteriana supragingival provee condiciones propicias para el establecimiento de la flora periodontopa- tógena, cuya presencia es necesaria pero no suficiente para desencadenar la enfermedad periodontal. En 2002 Kimura y colaboradores2, aseguran que la colonización de los microor- ganismos periodontales puede ocurrir tempra- namente en la niñez sin evidencias clínicas de enfermedad periodontal. En 2003 Darby y Curtis3, sugieren que la colonización por P. Gingivalis, A. Actinomycetemcomitans y T. Forsythensis puede ocurrir a una edad muy temprana. De modo que el aumento de la placa supragingival colabora en el desarrollo de placa subgingival favoreciendo a futuro con las pato- logías periodontopatógenas. La hipótesis que planteda es que la aplicación de un programa de intervención de higiene bucal contribuye a disminuir la cantidad de placa bacteriana y a modificar la presencia de Porphyromona gingivalis en escolares de 6º y 7º Año Básico de la Comuna de Chiguayante. De modo que se evalúa antes y después del programa de inter- vención de higiene bucal la presencia de placa bacteriana supragingival y de Porphyromona gingivalis; siendo éste el objetivo del trabajo.
Para este estudio se utilizó un enfoque metodo- lógico cuantitativo, usando para ello un estudio de cohorte.
CONCLUSIONES
El programa de intervención de higiene bu- cal demostró a los 30 y 60 días, una disminución significativa de la placa bacteriana (21,15 y
29,45%) y de la presencia de Porphyromona gingivalis (21,45 y 16,12%), siendo esta dife- rencia significativa sólo a los 30 días. Estudios futuros permitirán evaluar el com- portamiento de la flora bacteriana subgingival por período mayor de tres meses.
AGRADECIMIENTOS
Al financiamiento de la Dirección de Inves- tigación de la Vicerrectoria Académica (VRA)
de la Universidad del Desarrollo a través del Proyecto de Biomarcadores Salivales. Además al Departamento de Educación de la Ilustre Municipalidad de Chiguayante por facilitar el acceso a las escuelas municipalizadas Hipólito Salas y Bélgica de la Comuna de Chiguayante.
REFERENCIAS
2.- Kimura A, Ooshima T, Takiguchi M, et al: Perio-
dontopathic bacterial infection in childhood. Journal
Periodontol 2002; 73: 20-6.
3.- Darby I, Curtis M: Microbiología de la enfermedad periodontal en niños y adultos jóvenes. Periodontology
2000-2003; 4: 33-53.
4.- Mcclellan D, Griffen A, Leys E: Age and prevalence of porphyromonas gingivalis in children. J Clin Microbial 1996; 34: 2017-9.
5.- Lamell C, Griffen A, McClellan D, Leys E: Acquisition and colonization stability of actinobacillus actinomy- cetemcomitans and porphyromonas gingivalis in children. Journal of Clinical Microbiology 2000; 38 (3): 1196-9.
6.- Goodson J, Palys M, Carpino E, Regan E, Sweeney
M, Socransky S: Microbiological changes associated with dental prophylaxis. Jada 2004; 135: 1559-
64.
7.- Dalawai F, Spratt D, Pratten J: Modeling shifts in microbial populations associated with health or disease. Appl. And Enviro Microb 2006; 72: 3678-84
8.- Serrano C, Nogerol R: Prevención y mantenimiento de la patología periodontal y periimplantaria. Av Periodon Implantol 2004; 16 (2): 65-79.
9.- Concalves A, Cople L, Braga R, Lavigne L: Preventive strategies in oral health promotion. Ciência & Saúde Coletiva 2005; 10: 279-86.
10.- Gafan G, Lucas V, Roberts G, Petrie A, Wilson M, Spratt D: Prevalence of periodontal pathogens in den- tal plaque of children. Journal of Clinical Microbiology
2004; 42 (9): 4141-6.
11.- Ministerio de Salud: Norma en prevención de enfer- medades gingivales y periodontales. 1998. www. minsal.cl/ici/salud_bucal/saludbucal.html


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